1. 抗体浓度过低或孵育时间不足。2. 抗原修复不充分。3. 组织固定过度。4. 检测系统灵敏度不够。5. 切片厚度不一致。解决方法：优化抗体工作浓度，延长孵育时间；确保修复液新鲜且温度达标；控制固定时间；使用高灵敏检测系统；保持切片厚度均一。
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