通用增强型免疫组化二抗PLUS(HRP标记)

货号MYE07

规格A液60ml+B液60ml(MYE07-1)、A液500ml+B液500ml(MYE07-2)、A液1000ml+B液1000ml(MYE07-4)

第二抗体(Secondary Antibody)是免疫检测系统中核心的一种通用型试剂,其可通过特异性结合第一抗体来实验对靶抗原的间接检测,并能够显著放大检测信号来提升检测的灵敏度。

通用增强型免疫组化二抗PLUS包含有增强剂(A液)和HRP标记二抗(B液)两种试剂。在一抗与靶抗原特异性结合后,增强剂可在一抗周围搭建大量的额外结合位点,以此来大幅增加后续HRP标记二抗的结合数量。最终该技术在保留了二抗的紧密结构和对一抗的高亲和力的同时,还使得单个抗原位点聚集了远多于常规体系的HRP,从而实现了信号的多级放大,保证低丰度靶标的精确检测。

此外,该产品摒弃了传统的生物素-链霉亲和素的信号放大路径,从根源上避免了由组织的内源性生物素所引起的假阳性和非特异性背景着色问题,从而显著提升阳性信号与背景的对比度。

    CD21 (MY149)在扁桃体的生发中心大多数滤泡树突状细胞显示强的胞膜棕色染色,套区B细胞显示中等的棕黄色染色,T细胞和鳞状上皮细胞无染色。
    CD45 (MY221)在扁桃体几乎所有的B细胞和T细胞胞膜显示中等到强的胞质/胞膜棕色染色。
    CDX-2 (MY235)在结直肠癌几乎所有的肿瘤细胞显示强的胞核/胞质棕色染色。
    Cytokeratin 5/6 (MY024)在扁桃体所有的鳞状上皮细胞显示强的胞质棕色染色,淋巴细胞无染色。
    Cytokeratin 7 (MY019)在肺腺癌的肿瘤细胞和肺泡上皮细胞显示强的胞质棕色染色,淋巴细胞、血管、纤维细胞无染色。
    Cytokeratin 8 (MY061)在肝脏的肝细胞显示中等到强的胞膜为主的棕色染色,胆管显示强的胞质棕色染色。
    Cytokeratin 20 (MY013)在结直肠癌的肿瘤细胞显示明显的胞质棕黄色染色。
    E-cadherin (MY109)在乳腺的导管上皮细胞显示强的胞膜棕色染色。
    Estrogen Receptor α (MY007)在乳腺癌的导管上皮细胞显示中等至强的胞核棕色染色,肿瘤细胞、肌上皮细胞和间质细胞无染色。
    Ki-67 (MY004)在扁桃体生发中心大部分的淋巴细胞显示明显的中至强的胞核棕色染色。
    MSH2 (MY044)在阑尾的腺上皮细胞和间质细胞显示胞核染色,淋巴小结里的套区B细胞和T细胞显示弱至中等的胞核染色,生发中心的B细胞显示中等至强的胞核染色。
    MUC2 (MY054)在结直肠癌的肿瘤细胞显示明显的胞质棕色染色。
    Napsin A (MY177)在肺腺癌的肿瘤细胞显示强的胞质棕色染色。
    p53 (MY081)在结直肠癌的绝大部分肿瘤细胞显示强的胞核染色。
    p57Kip2 (MY047)在胎盘的滋养层细胞显示中至强的胞核棕色染色,合体滋养层细胞无染色。
    P63 (MY021)在扁桃体的鳞状上皮细胞显示中等到强的胞核棕色染色,散在的淋巴细胞弱至中等的胞核棕黄色染色。
    Progesterone Receptor (MY025)在乳腺癌的肿瘤细胞显示强的胞核棕色染色。
    S100 (MY072)在阑尾的神经节细胞和轴突显示中等到强的胞核/胞质棕色染色,平滑肌和腺上皮细胞无染色。
    TTF-1 (MY103)在肺腺癌的肿瘤细胞显示强的胞核染色。
    1. 将组织切片依次在2缸新鲜二甲苯中各浸泡10分钟,后依次在无水乙醇、95%乙醇和85%乙醇中各浸泡5分钟。用蒸馏水轻柔浸洗1分钟。
    2. 将组织切片放入高压锅中的Tris-EDTA (pH 9.0)抗原修复液,加热至喷气后计时2分钟。计时结束并自然冷却5分钟后,灌水快速冷却。用蒸馏水轻柔浸洗2次,每次3分钟。
    3. 将组织切片在过氧化物酶阻断剂(3% H2O2)中浸泡10分钟。用蒸馏水轻柔浸洗2次,每次3分钟。
    4. 小心拭去组织切片周围多余液体,用免疫组化油笔围绕组织边缘2 ~ 3 mm处画圈。用蒸馏水轻柔浸洗2次,每次3分钟后,将组织切片浸泡在PBS缓冲液中。
    5. 滴加适量的一抗工作液于圈内,确保其完全覆盖组织。在湿盒中室温孵育30 ~ 60 min。用PBS缓冲液冲洗2 ~ 3 次,并轻柔浸洗2次,每次3分钟。
    6. 滴加适量的二抗A液于圈内,确保其完全覆盖组织。在湿盒中室温孵育10 min。用PBS缓冲液冲洗2 ~ 3 次,并轻柔浸洗2次,每次3分钟。
    7. 滴加适量的二抗B液于圈内,确保其完全覆盖组织。在湿盒中室温孵育10 min。用PBS缓冲液冲洗2 ~ 3 次,并轻柔浸洗2次,每次3分钟。
    8. 滴加适量的DAB工作液于圈内,确保其完全覆盖组织。在湿盒中室温孵育5 min。用蒸馏水终止显色反应。
    9. 将组织切片置于苏木素染色液中复染 8 ~ 10 s。用蒸馏水冲洗干净。将组织切片置于1%碳酸锂溶液中返蓝 8 ~ 15 s,用蒸馏水冲洗干净。
    10. 将组织切片依次在85%乙醇、95%乙醇和无水乙醇中各浸泡3分钟,后在1缸新鲜二甲苯中浸泡5 ~ 10 min。用中性树胶封片并显微镜观察。
    类型
    第二抗体
    形式
    液体
    运输条件
    生物冷藏冰袋
    存储条件
    2 ~ 8℃
    有效期限
    18个月
    分装信息
    建议分装存储
    存储信息
    建议避光、避热存储,避免反复冻融