Fibrinogen（FITC）产品说明书
Fibrinogen（FITC）说明书
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【产品名称】
Fibrinogen（FITC）
【包装规格】
0.2ml/瓶（FITC）。
【预期用途】
在常规染色基础上进行免疫组织化学染色，为医师提供诊断的辅助信息。
【检测原理】
免疫组织化学(Immunohistochemistry ,IHC) 采用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色物质（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来检测组织细胞抗原，对其进行定位、定性的检测。本试剂采用Fibrinogen抗体与靶细胞的蛋白特异性结合的原理，进行化学反应使标记在抗体上的显示物质（荧光素）显色来检测组织细胞抗原，对其进行定性的检测，辅助临床对于肾炎的诊断和鉴别诊断。对任何阳性或阴性结果的解读，应由病理医生结合病理形态学、临床表现及其它检测方法进行，不作为单独的诊断指标。
本试剂为FITC标记的兔多克隆抗体。
【主要组成成分】
由Fibrinogen（FITC）抗体、缓冲液组成。
以下仪器及材料需自备：
<仪器>家用电磁炉（最大功率：2000W）；电磁炉用不锈钢高压锅（内径18cm ）；恒温箱；pH计。
< 材料 > 防脱载玻片；二甲苯（或二甲苯替代剂）；无水乙醇；纯化水；免疫组化抗原修复缓冲液[ 柠檬酸（pH6.0±0.1）/EDTA（pH8.0-8.2）/Tris-EDTA（pH9.0-9.2）/酶修复液]；清洗液[ PBS磷酸盐缓冲液（pH7.4-7.6）]；过氧化物酶阻断剂；抗体稀释液；甘油。
【储存条件及有效期】
2~8℃保存，有效期18个月。
本产品应在使用时方从2-8℃冰箱取出，使用完毕，应立即放回2-8℃冰箱保存。
试剂生产日期及失效日期见产品包装标签。
【样本要求】
1、适用标本类型：10%中性（磷酸盐缓冲液）福尔马林固定的石蜡包埋组织；
2、标本采集：采集外科手术标本；
3、标本的固定：从取材到固定的时间不超过1小时，固定的时间以6-48小时为宜；
4、固定液类型：10%中性（磷酸盐缓冲液）福尔马林固定液；
5、切片厚度：3～5μm之间；
6、样本保存：室温下（25±2℃）保存不应超过5周。
【检测方法】
1、试剂配制
为浓缩型试剂，需稀释后使用，建议稀释比为1:60。
2、样本处理
切片：切片约3-5μm厚；
烤片：60℃，120分钟；
脱蜡，水化：二甲苯(或二甲苯替代剂)脱蜡10分钟×2次→无水乙醇5分钟×2次→95%乙醇5分钟→PBS浸泡5分钟。
抗原修复：酶修复（37℃ 10-20分钟），滴加适量的酶修复液于画好圈的组织切片上。修复完毕后，PBS冲洗并浸泡；
甩掉并小心拭去组织上及周围过多液体，滴加Fibrinogen抗体试剂工作液1滴（50-100μl）覆盖切片上组织，37℃避光孵育60分钟，甩掉液体，用PBS浸洗，5分钟×3次；
用50%缓冲甘油封片；
用中性树胶将盖玻片边缘封固；
显微镜下观察并拍照保存。
注意事项：
(1) 如果荧光背景高，可在封片前用0.01%的伊文氏蓝（PBS配制）复染5秒。
(2) 勿将组织捞在玻片边缘。
(3) 组织位置应能保证组织染色过程中被试剂完全覆盖。
3、结果判断
3.1 染色阳性：组织切片中可见目标细胞显示黄绿色荧光，且无背景染色。
3.2 染色阴性：组织切片中未见目标细胞显示黄绿色荧光。
4、质量控制
4.1阳性对照：每次检测都必须同时做质控片，质控片必须和病例样本一同操作，来对比操作的过程。质控片为IHC检测为Fibrinogen阳性的标本片，可以购买商品化对照片或者选择已知的对照样本或细胞系按照上文所述方法自行制片。质控片结果分析方法同上述标准，如果质控片无法达到分析的要求，则该批实验结果不可以被分析。
4.2空白对照：操作步骤同阳性对照，在一抗孵育时用PBS替代一抗试剂，结果应无着色现象。
4.3要结合HE染色切片确定免疫反应阳性的细胞是否为目标细胞或有意义的细胞。
4.4不论阳性的细胞数量或染色强度如何，只要是真实的阳性表达，定位正确，都对诊断有帮助。
【检测方法的局限性】
对于无法做该检测的标本：如组织有明显挤压现象则不应做该检测；如组织从切除到进入固定液的时间过长（＞1小时）、组织固定时间不足（＜6小时）；组织固定液不是10%中性（磷酸盐缓冲液）福尔马林固定液（除非已经被该实验室确定为有效的固定液）；或者未染色的白片常温储存超过5个星期；以上情况都不适合检测Fibrinogen。
本试剂只用于体外检测，适用于10%中性（磷酸盐缓冲液）福尔马林固定液固定的石蜡包埋组织中Fibrinogen的定性检测，不适用于使用其他类型的标本和固定剂。样本及制片质量都会影响本试剂的检测结果。本试剂的检出结果仅供临床参考，假如实验结果与临床所见不符，应由病理医生和临床医生进行会诊，不能单独作为确诊或治疗的依据。
【注意事项】
本品供专业人员使用，本品仅用于体外检测；
实验前请仔细阅读本说明书；
实验室管理应严格按照免疫组化实验室的管理规范，实验人员必须进行专业基础和技能培训，熟悉免疫组化实验的操作，实验过程中穿工作服，戴一次性手套，使用自卸管移液器；
对每次实验进行质量控制；
配制试剂除特别说明外，均使用纯化水配制；
有毒有害试剂处理需按照相应程序处理；
避免微生物感染试剂，否则非特异性染色会增加；
任何生物来源的标本或试剂，处理或使用时都要做好安全防范措施；
若发现试剂浑浊有絮状沉淀请勿使用；
本试剂滴出后一次性使用，切勿回收使用。
【参考文献】
[1]苗小芬等.165例小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术分析.广西医学,2011,33(2):174-176.
【生产企业】
广州勉易生物科技有限公司
Myabtech Biological Inc.
地址：广州市黄埔区神舟路 18 号润慧科技园5栋（自编号C-3）1402房
电话号码：020-89858157
Address ：Room 1402, Building F (Self-designated C-3), No. 18 Shenzhou Road, Huangpu District, Guangzhou City
Telephone：020-89858157